Alzet渗透泵的基本操作指南

　　Alzet渗透泵的基本操作指南

　　一、Alzet渗透泵型号选择

　　Alzet渗透泵提供了100ul、200ul和2ml三种不同的药物容量规格，持续时间从3天到6周不等。实验时应根据具体需求选择合适的型号。其中，100ul和200ul的适合成年小鼠使用，而2ml的由于容积较大，更适合大鼠或其他体型较大的动物。

　　二、Alzet渗透泵浓度计算

　　药物浓度的调配需根据每日用药量和缓释泵的输送速率两项参数来计算，每日用药量可通过查阅专业文献获取。此外，每支缓释泵的输送速率信息会附在包装盒上，应根据包装上的速率进行配药。

　　浓度计算举例：

　　Eg：2001渗透泵，给药：抗利尿激素(ADH)，

　　1.查阅文献发现，大鼠正常的ADH分泌量为30ng/天/只，或1.25ng/小时/只。然后，计算出完成1.25ng/小时所需输注量所需的ADH浓度：

　　ko=Q•Cd

　　其中ko(µg/hr)是质量输送速率，Cd(µg/µl)表示药物溶液浓度，Q(µl/hr)表示泵的泵送速率。

　　2.2001型泵的(标称)泵送速率为1µl/hr(Q)，因此所需浓度(Cd)为：

　　Cd=1.25 ng/hr/1µl/hr=1.25 ng/µl

　　=1.25 x 10-3µg/µl

　　3.2001型泵储液体积(标称)为200µl。为了达到所需的1.25 x 10-3µg/µl浓度，应在200µl中溶解的ADH量为：

　　m=c•v

　　(1.25 x 10-3µg/µl)x 200µl=0.25µg

　　综上，为了模拟大鼠正常的ADH分泌量30 ng/天/只（或1.25 ng/小时/只），必须在溶液中配制浓度为1.25 x 10-3µg/µl的ADH溶液。应配制过量溶液，以保证泵填充期间的安全裕度。

　　注意事项：

　　1、不能根据Alzet渗透泵自身体积来计算配药浓度，Alzet渗透泵实际载药体积会稍大于宣称体积；

　　2、泵体埋入动物体内后应在释放周期结束时取出，不能一直留在动物体内。

　　三、Alzet渗透泵药液灌充

　　1、将Alzet渗透泵垂直握在手中，从顶部的孔处插入充液针，直至针尖轻轻接触到缓慢释放泵底部，然后略微向上提起充液针约1mm。

　　2、轻柔地推动注射器，将药液注入缓慢释放泵（缓慢释放泵应始终保持垂直）。当在缓慢释放泵的孔处看到药液溢出时，请停止注射，轻轻拔出充液针。

　　3、将流量调节器完q插入泵体，完成注射，随后进行培育或植入手术。

　　4、若泵体内出现气泡，可将流量调节器拔出并重新进行注射。

　　注意事项：

　　1、泵内药物液体需充盈，泵内不应有空气存在，否则可能导致泵送速度不稳定。

　　2、灌输速度宜适中，以免产生气泡，避免采用容积过大的注射器进行填充。

　　四、Alzet渗透泵泵体孵育

　　在Alzet渗透泵启动阶段，可能会出现泵送速率不稳定的情况。为了调节泵送速率，建议在植入前进行预处理。

　　1、准备50ml离心管，倒入适量的0.9%生理盐水。

　　2、将已灌装药液的Alzet渗透泵放入离心管中，然后将离心管放入37℃恒温箱中进行一定时间的培养（具体时间根据不同型号的Alzet渗透泵而异）。

　　注意：在培养过程中，确保生理盐水完q覆盖泵体。

　　五、Alzet渗透泵植入手术

　　Alzet渗透泵可在背部皮下或腹腔植入进行全身性给药；此外也可连接导管将药物引导到特定部位进行给药。

　　六、Alzet渗透泵皮下植入

　　1、使动物陷入麻醉状态，令其躺卧。

　　2、在肩胛骨之间的皮层上开启一个裂口。

　　3、利用止血夹分离皮下结缔组织，形成一处间隙。

　　4、将渐进泵植入其中，确保流量调节器不朝向切口。

　　5、利用伤口钳或缝合线缝合皮层切口。

　　七、Alzet渗透泵腹腔植入

　　1、麻醉动物，使动物处于仰卧姿态。

　　2、在动物的胸廓下腹中线的皮肤上用刀划开口。

　　3、镊子挑起腹肌，避免伤及内脏，然后用剪刀向下剪开腹肌。

　　4、将缓释泵植入切口，流量调节器不能朝向切口。

　　5、用缝线缝合肌肉切口，皮肤切口可以使用伤口夹或缝线缝合。

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