如何选择荧光蛋白

　　如何选择荧光蛋白

　　荧光标记在生物学的各个研究领域拥有广泛的应用，已成为探索体内或细胞结构与功能的重要工具。通常存在两种荧光标记方式，一是利用细胞表达的荧光蛋白，另一是采用化学合成的荧光分子。下面让我们一起来看看该如何选择荧光蛋白吧！

　　1.激发波长/发射波长：每一种荧光蛋白都具备d特的激发波长和发射波长，因此，所选荧光蛋白必须与实验系统的激发和检测能力相匹配。

　　2.寡聚反应：首代荧光蛋白易于形成寡聚体，当其与目标基因融合表达时，可能会对目标基因蛋白的生物学功能产生影响。因此，在融合表达时，建议使用单体荧光蛋白，如mCherry或EGFP。

　　3.氧气：许多荧光蛋白的成熟过程需要氧气参与，尤其是源自GFP的荧光蛋白，如EGFP、ECFP和EYFP。若这些荧光蛋白处于缺氧环境中，可能无法观察到荧光信号。

　　4.成熟时间：荧光蛋白的成熟时间指的是其正确折叠和发色团形成所需的时间，此过程可能持续几分钟至数小时。因此，在选择合适的荧光蛋白时，考虑其成熟时间非常必要。

　　5.温度：温度对荧光蛋白的成熟时间和荧光强度有影响。

　　6.亮度：荧光蛋白的亮度由消光系数和量子产率的乘积计算得出。在许多情况下，与EGFP相比较荧光蛋白的亮度，发现某些荧光蛋白十分暗淡，因此，亮度也是需要考虑的因素之一。

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