液体培养基的常见问题

　　液体培养基的常见问题

　　液体培养基是最为常见的培养基类型，它具有可进行通气培养或振荡培养的优势，因为它的流动性便于精确控制培养基的溶液温度、营养浓度和气体含量等；它对细胞生长时的附着能力要求小，细胞可快速扩增；当需要大量细胞培养时也更经济高效。那么你知道液体培养基的常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！

　　一、液体培养基为什么颜色不一样

　　酚红加量不同，导致颜色差异：DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12&F10。

　　二、培养基放冰箱里颜色变深

　　空气中CO2浓度低，培养基内CO2会逐渐溢出，HCO3-减少，造成培养基偏碱。

　　三、含有谷氨酰胺培养基的保存条件

　　谷氨酰胺对温度敏感，温度越高降解速度越快。谷氨酰胺在溶液中不稳定，单独保存应置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰胺的液体培养基应存放在2°C–8°C，或者购买不含谷氨酰胺的培养基使用时添加。

　　四、液体培养基可以放-20℃及以下保存吗

　　不可以。在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基融化后，有些盐无法重新溶解，从而导致渗透压降低。液体培养基放在2-8℃长期保存。液体培养基保存要避光。培养基中的某些成分遇光会产生过氧化氢，具有细胞毒性

　　五、购买的液体培养基可以保存多久

　　理论上只要保存得当，保质期范围之内都可以用。但实际开瓶后保存时间过长会导致液体培养基中盐分的析出和pH值的改变，因此建议开瓶后尽快用完

　　六、更换培养基后细胞长不好

　　（1）各厂家培养基配方并非完q相同，可能细胞已经适应当前的培养体系；

　　（2）原代细胞更容易适应新的培养基，而传代细胞系更换比较难；

　　（3）刚复苏的细胞不要用来适应新培养基，细胞活率低，待状态稳定后再用来驯化；

　　（4）敏感性细胞适应培养基，需要多驯化几代，期间细胞死亡数量减少，生长缓慢是正常现象。

　　七、DPBS和PBS有什么区别，能通用吗

　　都属于磷酸盐缓冲液，成分上只有一点点磷酸盐的含量差异，均有等渗和调节pH的功能，大多数对于细胞的使用上可以通用。

　　八、HBSS和PBS/DPBS有什么区别

　　HBSS缓冲液中盐成分较PBS和DPBS更复杂，且含有葡萄糖，可为细胞提供简单的营养，而PBS/DPBS不能提供营养。

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