细胞因子检测的常见免疫学技术有哪些？

　　细胞因子，是一类由免疫细胞和某些非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）在受到刺激后合成和分泌的小分子蛋白质，具有广泛的生物学活性，通过结合相应受体，调控细胞生长、分化、凋亡、伤口愈合、信号转导和稳态平衡。研究细胞因子为临床上疾病的预防、诊断、机理研究以及治疗奠定了坚实基础，其应用前景广泛。那么你知道细胞因子检测的常见免疫学技术有什么吗？让我们一起来看看吧！

　　一、传统Western Blot

　　传统蛋白质免疫印迹法（Western Blot，WB）是一种常见的蛋白质免疫分析技术，被应用于确认特定蛋白质的存在并进行定性和半定量分析。WB实验基于抗原抗体特异性反应，经过SDS-PAGE分离蛋白质后，将其转移到硝酸纤维素薄膜（NC）或聚偏二氟乙烯膜（PVDF）。随后，使用脱脂牛奶封闭液进行封闭，一抗稀释液进行孵育。蛋白质与抗体结合后，通过洗涤去除未结合的一抗，接着加入酶标记或者荧光标记的二抗。最后，利用化学发光液或者特定的激发光源，对靶蛋白进行检测，可以通过胶片、化学发光仪或荧光成像仪进行成像，最终捕捉到蛋白条带。

　　二、全自动毛细管Digital Western

　　作为创新性毛细管电泳免疫学技术，全自动毛细管Digital Western（也称Simple Western）将Western Blot技术和ELISA技术合二为一，具备传统WB蛋白质可视化定性优势，同时具备ELISA免疫学实验精准定量能力，其灵敏度和精密度符合高标准生物分析要求，可利用超微量样本实现内源性蛋白质精准定量。自动化规避了传统WB和SDS-PAGE劳动密集型操作引入的人为误差。仅需要微量样本（3μL）即可实现多重蛋白质表达检测，节约珍贵样品，

　　三、传统ELISA

　　酶联免疫吸附测定法是一种常用的免疫测定方法，通常用于定量检测样本中目的蛋白的水平。利用ELISA检测的样本包括血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解物、唾液、组织裂解物和尿液。ELISA通常在96孔板中进行，孔板中包被有一种捕获特定分析物的抗体。在与实验样本、标准品或对照品孵育后，目标分析物将被这种抗体捕获。随后使用结合到目标分析物不同抗原表位的检测抗体完成"夹心"结构。接着加入底物溶液，产生的信号与结合的分析物量成比例。ELISA有不同形式，包括直接法ELISA、间接法ELISA、夹心法ELISA和竞争法ELISA。

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