体外细胞培养技术——培养基

　　体外细胞培养技术——培养基

　　细胞的体外培养即提取机体组织的某一类细胞，在体外模拟体内环境，使细胞能够生存繁衍的技术。体外细胞培养离不开细胞培养基这一直接生存环境，对于结构复杂的生物而言，许多细胞特别是一些分化程度不高的细胞在脱离机体后是比较易受生存环境的影响而导致变异等情况出现，使得实验失败。因此细胞的培养条件需严格按照标准，满足细胞生长对营养成份、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的需求。那么你知道培养基需要哪些条件吗？让我们一起来看看吧！

　　一、营养成分

　　1.氨基酸

　　蛋白质合成所需的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸、半胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺，它在细胞代谢过程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶合成的来源，同样也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物质。

　　2.单糖

　　在培养过程中，细胞可以通过有氧呼吸与无氧呼吸作用对培养基中的单糖进行酵解以获取能量来满足细胞进行正常生理活动的需求，其中以六碳糖为主。六碳糖还是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的重要原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高，半乳糖低。

　　3.维生素

　　主要扮演辅酶、辅基的角色，不可少。生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12都是培养基常有的成分。

　　4.无机离子与微量元素

　　细胞生长除需要钠钾钙镁氮和磷等基本元素，微量元素也是不可少的，如铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等。

　　二、促生长因子及激素

　　越来越多的实验证实各种激素、生长因子对于维持细胞的功能、保持细胞的状态(分化或未分化)具有十分重要的作用。有些激素对许多细胞生长有促生长作用，如生长激素可以促进蛋白质的合成，加强对钠、钙、钾、磷、硫等重要元素的吸收。

　　三、pH

　　大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，培养基偏离此范围便会对细胞将产生有害影响。

　　造成pH波动主要是代谢产生的CO2，在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸，培养基pH很快下降，因此在细胞体外培养过程中pH值是动态变化的。

　　为解决这一问题，培养基应具一定的缓冲能力即每时每刻都需要具备自动调节PH值的能力。合成培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养的方式，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，在通过稳定调节温箱中CO2浓度(5%)，使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态。

　　四、无毒、无污染

　　体外进行培养的细胞对微生物及一些有害有毒物质几乎没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染(如细菌、真菌、支原体、病毒等)、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染(如抗体、补体)。

　　对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。

　　对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。

　　更多有关培养基的培养条件，请联系北京百奥创新科技有限公司。