细胞实验的常见问题有哪些？如何解决呢？

细胞培养做为生物学研究最基础的技术之一，可以说是渗透科研界的方方面面。那么细胞实验中的常见问题有哪些？应该如何解决呢？让我们一起来看看吧！

一、如何选用细胞系培养基？

优先根据细胞来源公司提供的培养条件，。一般建议不要随意更换培养基种类。细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用与原先提供的培养条件不同的培养基，可能造成细胞形态发生变化或无法存活，以及细胞的表型功能丢失。

二、细胞发生微生物污染时，应如何处理？

直接丢弃或更换，将未受污染的细胞转移至其它培养箱，并用消毒剂消毒培养器皿和超净台以及二氧化碳培养箱。如发生真菌霉菌污染，需用紫外灯照射整个细胞间，从而消除可能产生的孢子。同时排除使用试剂的污染，包括培养基和血清，可以空培试验。

三、为何培养基用一段时间后，颜色偏紫？

培养基随着多次开盖会使培养液 CO2 逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性从而变紫，尤其是剩余的培养基越少越容易变紫。可将培养瓶瓶盖旋松放入二氧化碳培养箱校正溶液 PH 值，过一段时间就会变回正常。变紫的培养基是可以继续使用的，培养细胞时在培养箱会自动恢复颜色。

四、细胞培养液变黄变浑，如何处理？

细胞培养液变黄多半是细胞密度过大，细胞增殖速度过快，产生大量酸性代谢废物，导致细胞营养不足。而培养液变浑多半是发生了细菌污染。出现这种情况应立即进行消化传代处理。

五、血清中出现的沉淀是什么，有影响吗？

① 纤维蛋白，是经常出现的较大沉淀物，可达到 1～2 mm，用肉眼可观察到；

② 胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质，是血清出现沉淀物的常见原因；

③ 磷酸钙，也是一种常见沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在 37 ℃ 培养时会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。

这些沉淀对细胞的生长是没有影响的，如想去除沉淀，尽量采用离心方法，不建议使用过滤方法，因为会堵塞滤膜而且会造成污染的风险。

六、细胞支原体污染如何处理？

支原体污染是比较难去除的，特别容易复发，一般建议直接更换新的细胞，如特别精贵或重要的细胞可尝试使用四环素、大环内酯类抗生素（泰乐霉素）、喹诺酮类抗生素。

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