PEI线性转染试剂的具体操作流程是怎样的

　　PEI线性转染试剂是由一种阳离子聚合物转染试剂，分子量40000，它能与核酸形成复合物，并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性PEI转染试剂广泛适。该试剂可在含血清与抗生素的*培养基中发挥作用，即使在有血清存在的情况下，它仍然能高效的将核酸导入细胞。实验操作简单，对大多数培养细胞都有较高的转染效率(用于常见细胞系，如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等)，并且细胞毒性较低。

　　PEI线性转染试剂的操作流程：

　　1、细胞铺板

　　提前一天将细胞种植在六孔板中，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

　　2、转染过程

　　（1）在转染前2h，移除细胞上原有的培养基，换为新鲜的*培养基。

　　（2）将2ug质粒DNA用50uL无血清稀释液稀释，充分混匀制成DNA稀释液。

　　注意：无血清稀释液建议采用Opti-MEM或ddH2O

　　（3）向DNA稀释液中直接加入4uL转染试剂，室温静置10~15min。转染复合物配制完成。

　　（4）将转染复合物加入细胞培养基中，轻柔混匀。

　　（5）继续培养24~48h，收取细胞进行鉴定或加入相应抗生素筛选稳定克隆。

　　（6）使用本产品转染后一般在24h开始进入表达高峰期，36~48h达到表达高峰，相对于脂

　　质体转染试刘，达到峰值的时间延后约6~12h。

　　PEI线性转染试剂的注意事项：

　　1）本产品对细胞非常温和，一般情况下转染后无需进行换液操作。

　　2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。